loading buffer是什么作用

核酸電泳中l(wèi)oading buffer的作用：

（1）指示作用：內(nèi)含劑溴酚藍和二甲苯氰，顯示電泳的進程，以便適時終止電泳；

（2）沉降樣品：成分甘油可以加大樣品密度，使沉到點樣孔中防止樣品飄出；

（3）變性聚合酶：SDS主要是促使聚合酶變性，避免其結(jié)合在DNA雙鏈上影響遷移速率。

loading buffer在蛋白電泳中的作用：

（1）溴酚藍指示電泳位置、使樣品沉入點樣孔；

（2）內(nèi)含還原劑破壞二硫鍵，而不會破壞蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)，不影響WB檢測，因為WB主要只是測蛋白表達量，而不需要蛋白的高級結(jié)構(gòu)；

（3）使SDS與蛋白按比例結(jié)合，使蛋白表面均勻帶上負電荷

（4）煮沸使蛋白酶失活，中止酶促反應(yīng)，防止提取的蛋白質(zhì)降解；

（5）煮沸使DNA充分打斷變性；。