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層析柱原理和使用方法

時(shí)間:2024-11-30 04:54:38 瀏覽量:

一,原理

柱層析操作時(shí),先在圓柱管中填充不溶性基質(zhì),形成一個(gè)固定相。將樣品加到柱子上,用特殊溶劑洗脫,溶劑組成流動(dòng)相。在樣品從柱子上洗脫下來的過程中,根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動(dòng)相中分配系數(shù)不同,經(jīng)多次反復(fù)分配將組分分離。

柱層析法

二,使用方法

從天然產(chǎn)物中提取、分離和表征生物小分子,是新藥研發(fā)中獲得先導(dǎo)化合物的主要途徑之一。層析法(Chromatography)是天然產(chǎn)物分離較為常用的方法之一。 層析法較早是根據(jù)化合物顏色分離一些植物色素,如今,層析法已經(jīng)演變成為一種高度敏感的、有效的化合物分離和鑒定方法。柱層析一般包括常壓柱層析、中壓柱層析和高壓柱層析。按照柱填料又可分為柱層析硅膠、離子交換層析、凝膠滲透色譜、疏水作用色譜等,其中以柱層析硅膠(正/反相)使用較為為廣泛。與其他層析方法相比,柱層析具有操作簡(jiǎn)單,經(jīng)濟(jì)實(shí)惠 ,樣品承載量大等優(yōu)點(diǎn),是天然產(chǎn)物分離純化的方法之一。

層析柱是凝膠層析技術(shù)中的主體,一般用玻璃管或有機(jī)玻璃管。根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動(dòng)相中分配系數(shù)不同,從而分離的一種層析法。柱層析技術(shù)(chromatography) 又稱柱色譜技術(shù),主要原理是根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動(dòng)相中分配系數(shù)不同,經(jīng)多次反復(fù)分配將組分分離開來。

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