分子生物學實驗包括哪些實驗

　離心技術：

是分離純化蛋白質(zhì)、酶、核酸（DNA、RNA）、細胞的最常用方法之一。

電泳（electrophoresis）：帶電粒子在電場中向著與其所帶電荷相反方向電極移動的現(xiàn)象。

可用于分離不同分子量的生物大分子。

1.蛋白質(zhì)的電泳：

用途：蛋白質(zhì)的定量。

2.核酸的電泳：

用途：用于核酸的分離、鑒定、純化、回收。

比如：我只需要長度300bp左右的分子。那么，電泳后，在切膠過程中，只切300bp處的分子即可。

蛋白質(zhì)研究相關的技術：

1. 含量測定：

2. 結(jié)構的測定：

（1）一級結(jié)構的測定：搞清楚蛋白質(zhì)肽鏈的氨基酸排列順序。

方法：Edman降解法、質(zhì)譜法（MS, 將蛋白水解，多肽鏈分成小段。檢測肽段）

（2）空間結(jié)構測定：蛋白空間結(jié)構分析比一級結(jié)構分析復雜得多。

方法：X射線衍射晶體分析法、核磁共振法等。

3. 功能的測定：

（1）酵母雙雜交（YTH）：

假設：欲檢測蛋白X與蛋白Y是否相互作用。

檢測方法：

將蛋白X與報告基因轉(zhuǎn)錄因子的BD融合；

將蛋白Y與AD融合；

確認蛋白X與蛋白Y形成的復合體能否激活報告基因的表達。如果能激活報告基因的表達，說明：X與Y形成了復合體，則BD和AD靠近，激活了下游報告基因的表達；反之，報告基因不表達。

原理：

真核生物的轉(zhuǎn)錄因子（尤其是酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4），包括兩個彼此分離、但功能必需的結(jié)構域：一個是與DNA結(jié)合的結(jié)構域-BD；一個是轉(zhuǎn)錄激活域-AD。BD識別轉(zhuǎn)錄因子效應基因的上游序列并與之結(jié)合；AD通過與轉(zhuǎn)錄復合體的其他成分作用，啟動下游的基因轉(zhuǎn)錄。

即使BD與AD分開，但如果在空間上較為接近時也能激活轉(zhuǎn)錄?！棉D(zhuǎn)錄因子的BD、AD這一特性，通過檢測轉(zhuǎn)錄因子是否啟動了其效應基因的表達，可研究蛋白質(zhì)X與Y是否相互作用。

（2） 蛋白質(zhì)芯片技術：一種高通量、微型化、自動化的蛋白質(zhì)分析技術。一次試驗中可同時檢測幾百甚至幾千種目標蛋白或多肽。

（3）免疫印跡技術 Western blotting：利用抗原抗體特異反應的原理。

用途：檢測樣品中特定蛋白質(zhì)是否存在以及半定量分析、研究蛋白質(zhì)間的相互作用。